問：體外診斷試劑參考范圍涉及不同年齡分布時，應怎樣選擇臨床試驗樣本？

答：臨床試驗設計過程中，納入受試者例數除需關注總例數、陽性和陰性例數分布外，還應關注必要的受試者亞組和分層需求。

如定量檢測試劑盒的參考范圍在不同年齡段人群中有不同區間，則納入受試者時，應考慮不同年齡段人群的差異。對于境內已有同類產品上市的情形，應保證各個年齡段均具有一定數量的受試者入組，且每個年齡段人群中正常范圍和異常范圍的受試者均應有一定數量。對于尚無同類產品上市的情形，針對每個年齡段均應保證受試者例數分別滿足統計學要求，從而對建立的參考范圍進行確認。

問：體外診斷試劑臨床試驗能否使用凍存樣本？

答：體外診斷試劑臨床試驗需使用符合入組標準的受試者樣本，同時應注意樣本的采集、保存和運輸條件等應符合相關要求。原則上，臨床試驗中樣本的處理、檢測和數據分析等操作應最大可能與診斷試劑上市后臨床使用過程一致，如產品在臨床使用中只能針對新鮮采集樣本進行檢測，則臨床試驗中應盡量使用新鮮采集的樣本；如臨床使用過程中可能存在樣本保存過程（如一定條件下凍存）且說明書中明確了相應的樣本保存條件及有效期，則臨床試驗中也可納入部分相應保存條件下的樣本。無論使用新鮮采集樣本還是凍存樣本，均應確保入組樣本的保存條件和保存期限符合相應產品說明書的要求。

問：體外診斷試劑臨床試驗機構間樣本應該如何分配？

答：第二類和第三類體外診斷試劑應分別選擇至少兩家或三家臨床試驗機構開展臨床試驗，機構間的樣本分布應盡量均衡，包括各機構總樣本量和亞組分布。如產品包含多個適應癥，不同適應癥受試者應在各臨床試驗機構間盡量均衡分布；如產品包含多個被測標志物，不同標志物的陽性樣本應在各臨床試驗機構間盡量均衡分布。不同樣本類型的同源比對試驗按照法規要求，需在至少兩家臨床試驗機構完成，機構間樣本分布也應均衡。定量產品各臨床試驗機構入組樣本均應盡量覆蓋檢測范圍，定性產品各機構均應有一定數量的陽性和陰性樣本。

如有已發布的產品類指導原則，臨床試驗還應執行相應指導原則要求。例如，《病原體特異性M型免疫球蛋白定性檢測試劑注冊技術審查指導原則》要求，應選擇不少于30例感染急性期患者采集樣本進行考核試劑與病原體分離培養鑒定（或其他用于判斷感染急性期的方法）的比較研究；《藥物濫用檢測試劑技術審查指導原則》要求，應選擇檢測范圍內一定數量（30例）樣本與參考方法（如氣相色譜-質譜法）進行比對試驗等。這些試驗內容均可在其中一家臨床試驗機構完成。

問：用于定量檢測的體外診斷試劑，臨床試驗數據如何進行統計分析？

答：定量檢測試劑的臨床試驗中，如采用試驗用體外診斷試劑與同類已上市產品或其他定量檢測參考方法進行比較研究，則針對定量檢測的結果數據可采用回歸分析結合Bl and-Al t man方法進行一致性分析。

回歸分析中常用的方法有Passing-Babl ok回歸和Deming回歸等。數據統計分析時應計算回歸系數和截距的估計值及可信區間，也可同時進行假設檢驗，并對相關系數或決定系數等指標進行評價。如有需要，應考慮不同的樣本濃度區間試劑性能可能存在的差異，從而對總體濃度范圍進行區間分層統計。

同時，可采用Bl and-Al t man方法，通過計算一致性限度，評價兩種檢測結果的一致性，特別是針對醫學決定水平附近的檢測結果一致性進行分析。一致性限度應在臨床所能接受的界值范圍內。

定量檢測試劑的臨床試驗中，如果采用試驗用體外診斷試劑與定性判斷的臨床參考標準進行比較研究，則數據的統計分析可采用受試者工作特征曲線（ROC）的方法，以ROC曲線下面積反映試驗用體外診斷試劑的診斷價值，或同時比較兩種試劑的診斷價值。對于體外診斷試劑的臨床試驗，當采用ROC曲線的方法進行數據分析時，仍應進一步以推薦的陽性判斷值進行靈敏度、特異度等指標（及其可信區間）的評價。

本文由廣州佳譽醫療器械有限公司/佛山浩揚醫療器械有限公司聯合編輯